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RAPD分子標記的實驗原理及操作流程

發(fā)布時間:2015/5/5點擊次數(shù):2208

RAPD技術(shù)的全稱是隨機擴增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技術(shù)建立于PCR基礎(chǔ)之上,使用一系列具有10個左右堿基的單鏈隨機引物,對基因組的DNA全部進行PCR擴增,以檢測多態(tài)性。由于整個基因組存在眾多反向重復(fù)序列,因此須對每一隨機引物單獨進行PCR,單一引物與反向重復(fù)序列結(jié)合,使重復(fù)序列之間的區(qū)域得以擴增。引物結(jié)合位點DNA序列的改變以及兩擴增位點之間DNA堿基的缺失、插入或置換均可導(dǎo)致擴增片段數(shù)目和長度的差異,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離后通過EB染色以檢測DNA的片段的多態(tài)性。

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